NIBSC 11/206 流感抗-A(標(biāo)準(zhǔn)品)

1. 預(yù)期用途

流感抗血清試劑 11/206 使用適當(dāng)?shù)?NIBSC 抗原試劑制備用于 A/Perth/16/09 樣抗原的單次徑向擴散測定。抗血清試劑在綿羊 548、549、550 和 551 中針對 A/Perth/16/09 樣（NIB65 和 NYMCX-187）流感毒株的純化 HA 制備。通過用菠蘿蛋白酶處理從純化的病毒中提取 HA 抗原，并通過在蔗糖梯度上沉降純化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

2. 注意
NIBSC 11/206 流感抗-A(標(biāo)準(zhǔn)品) 不適用于人類食物鏈中的人類或動物。

該材料不是人或牛來源。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應(yīng)包括戴防護手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免割傷。

3. 單元

沒有為該材料分配單元。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國：英國。

綿羊 548 和 549 的免疫計劃如下：

肌肉注射一劑約 50 µg A/Victoria/210/2009 (NIB65) HA 和弗氏*佐劑 (FCA)，兩周后給予 10 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。每周間隔給予包括 FIA 在內(nèi)的另外 10 次 10 微克劑量的 A/Victoria/210/2009 (NIB65) HA。初次免疫后 12 周，收集血清并加入NaN3 (0.05% w/v)。然后通過 APHIS 批準(zhǔn)的滅活 FMDV 方法處理血清。

綿羊 550 的時間表如下：肌肉內(nèi)給予一劑約 50 µg A/Victoria/210/2009 (NYMCX-187) HA 和弗氏*佐劑 (FCA)，兩周后給予 10 微克劑量的 A /Victoria/210/2009 (NYMCX-187) 包括弗氏不*佐劑 (FIA)。一周后給予包括 FIA 在內(nèi)的另外 10 微克劑量的A/Victoria/210/2009 (NYMCX-187) HA。初次免疫后 4 周，收集血清并加入NaN3(0.05% w/v)。然后通過 APHIS 批準(zhǔn)的滅活 FMDV 方法處理血清。綿羊 551 的時間表如下：肌肉內(nèi)給予一劑約 50 µg A/Victoria/210/2009 (NYMCX-187) HA 和弗氏*佐劑 (FCA)，兩周后給予 10 微克劑量的 A /Victoria/210/2009 (NYMCX-187) 包括弗氏不*佐劑 (FIA)。每隔一周給予兩次 10 微克劑量的 A/Victoria/210/2009 (NYMCX-187) HA，包括 FIA。初次免疫后五周，收集血清并添加NaN3(0.05% w/v) . 然后通過 APHIS 批準(zhǔn)的滅活 FMDV 方法處理血清。

收集血清，然后用含有NaN3(0.05% w/v) 的 PBS 緩沖液按 1:2.4 稀釋并裝入 2ml 體積的小瓶中。

5. 存儲

NIBSC 11/206 流感抗-A(標(biāo)準(zhǔn)品)  推薦的儲存溫度為+2-8oC。但是，如果打算長期儲存試劑，即 > 2 年，則它們可以儲存在 - 20°C。抗血清可以冷凍和解凍，對 SRD 測定的使用沒有任何不利影響。

6. 開瓶指南

小瓶有螺帽；也可能存在內(nèi)部塞子。應(yīng)通過逆時針旋轉(zhuǎn)取下蓋子。應(yīng)注意防止內(nèi)容物丟失。請注意：如果在取下瓶蓋時有塞子，塞子應(yīng)留在小瓶中或隨瓶蓋一起取下。

7. 材料的使用

對于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的測定，應(yīng)將大約 12μl 未稀釋的試劑添加到 1ml 瓊脂糖中。可能需要根據(jù)當(dāng)?shù)貙嶒炇覘l件改變抗血清濃度。