NIBSC 12/116 流感抗-A(標(biāo)準(zhǔn)品)

1. 預(yù)期用途

流感抗血清試劑 12/116 使用適當(dāng)?shù)?NIBSC 抗原試劑制備用于 A/Victoria/361/2011 樣抗原的單徑向擴(kuò)散 (SRD) 測(cè)定。

抗血清試劑以綿羊558、559、560、561、562和563制備A/Victoria/361/2011樣病毒純化HA。純化病毒經(jīng)菠蘿蛋白酶處理提取HA抗原，沉淀純化關(guān)于蔗糖梯度（Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

2. 注意

NIBSC 12/116 流感抗-A(標(biāo)準(zhǔn)品) 不適用于人類食物鏈中的人類或動(dòng)物。

該材料不是人或牛來源。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對(duì)健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實(shí)驗(yàn)室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應(yīng)包括戴防護(hù)手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免割傷。

3. 單元

沒有為該材料分配單元。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國：英國。

所有綿羊的免疫計(jì)劃如下：一劑約 50 µg A/Victoria/361/2011 樣 (IVR-165) HA 與肌肉內(nèi)給予弗氏*佐劑 (FCA)，兩周后給予 10 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。一周后給予包括 FIA 在內(nèi)的另外 10 微克劑量的 A/Victoria/361/2011 樣 (IVR-165)。一周后，進(jìn)一步免疫 10 微克劑量的 A/Victoria/361/2011 樣 (NIB-79)。初次免疫后六周，收集血清并加入NaN3 (0.05% w/v)。然后通過 APHIS 批準(zhǔn)的滅活 FMDV 方法處理血清。收集血清，然后用含有NaN3 (0.05% w/v) 的 PBS 緩沖液按 1:3.75 稀釋并裝入 2ml 體積的小瓶中。

5. 存儲(chǔ)

NIBSC 12/116 流感抗-A(標(biāo)準(zhǔn)品) 推薦的儲(chǔ)存溫度為+2-8oC。但是，如果打算長(zhǎng)期儲(chǔ)存試劑，即 > 2 年，則可以將它們儲(chǔ)存在 -20°C。抗血清可以冷凍和解凍，對(duì) SRD 測(cè)定的使用沒有任何不利影響。

6. 開瓶指南

小瓶有螺帽；也可能存在內(nèi)部塞子。應(yīng)通過逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)取下蓋子。應(yīng)注意防止內(nèi)容物丟失。請(qǐng)注意：如果在取下瓶蓋時(shí)有塞子，塞子應(yīng)留在小瓶中或隨瓶蓋一起取下。

7. 材料的使用

對(duì)于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的測(cè)定，應(yīng)將大約 14μl 未稀釋的試劑添加到 1ml 瓊脂糖中。可能需要根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)驗(yàn)室條件改變抗血清濃度。