NIBSC 13/182 流感抗B(標準品)

1. 預期用途

流感抗血清試劑 13/182 使用適當的 NIBSC 抗原試劑制備用于 B/Massachusetts/02/2012 抗原的單徑向擴散測定。

抗血清試劑在綿羊 586、587、588、589 和 590 中制備到 B/Massachusetts/02/2012 病毒的純化 HA。通過菠蘿.蛋白酶處理從純化病毒中提取 HA 抗原，并通過蔗糖梯度沉淀純化 ( Brand, CN 和 Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

2. 注意

NIBSC 13/182 流感抗B(標準品) 不適用于人類食物鏈中的人類或動物。

該材料不是人或牛來源。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應被視為對健康有潛在危害。應根據您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應包括戴防護手套和避免產生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應小心謹慎，以免割傷。

3. 單元

沒有為該材料分配單元。

4. 內容

生物材料原產國：英國。

綿羊的免疫計劃如下：綿羊586；肌肉注射一劑約 50 µg B/Massachusetts/02/2012 HA 和弗氏*佐劑 (FCA)，兩周后給予 10 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。五個另外 10 微克劑量的B/Massachusetts/02/2012 包括 FIA 每周進行一次。初次免疫后八周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。綿羊 587 和 588；肌肉注射一劑約 50 µg 的 B/Massachusetts/02/2012 HA 和弗氏*佐劑 FCA），兩周后給予 10 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。每周間隔給予六次 10 微克劑量的 B/Massachusetts/02/2012，包括 FIA。初次免疫后九周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。綿羊 589 和 590；一劑約 50 µgB/Massachusetts/02/2012 肌內給予含有弗氏*佐劑 (FCA) 的 HA，兩周后給予 10 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。每周間隔給予八次 10 微克劑量的 B/Massachusetts/02/2012，包括 FIA。初次免疫后九周，收集血清并加入NaN3（（0.05% w/v）。然后通過 APHIS 批準的滅活 FMDV 方法處理所有五種羊血清。使用的處理方法是維持 pH5.5 或更低至少 30 分鐘。收集血清，然后用含有NaN3(0.05% w/v) 的 PBS 緩沖液按 1:2.4 稀釋并裝入 2ml 體積的小瓶中。

5. 存儲

NIBSC 13/182 流感抗B(標準品)  推薦的儲存溫度為+2-8oC。但是，如果打算長期儲存試劑，即 > 2 年，則可以將它們儲存在 -20°C。抗血清可以冷凍和解凍，對 SRD 測定的使用沒有任何不利影響。

6. 開瓶指南

小瓶有螺帽；也可能存在內部塞子。應通過逆時針旋轉取下蓋子。應注意防止內容物丟失。

請注意：如果在取下瓶蓋時有塞子，塞子應留在小瓶中或隨瓶蓋一起取下。

7. 材料的使用

測定 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原時，應將 12-15μl 未稀釋試劑加入 1ml 瓊脂糖中。可能需要根據當地實驗室條件改變抗血清濃度。