NIBSC 18/108 流感抗-A(標準品)

1. 預期用途

流感抗血清試劑 18/108 使用適當的 NIBSC 抗原試劑制備用于 A/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 樣抗原的單次徑向擴散測定。

使用 A/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 樣病毒的純化 HA 在綿羊 675、676、677、678 和 679 中制備抗血清試劑。通過菠蘿蛋白酶處理從純化病毒中提取HA抗原，并通過蔗糖梯度沉淀純化（Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。

2. 注意

NIBSC 18/108 流感抗-A(標準品) 不適用于人類食物鏈中的人類或動物。

該材料不是人或牛來源。與所有生物來源的材料一樣，這種制劑應被視為對健康有潛在危害。應根據您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應包括戴防護手套和避免產生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應小心謹慎，以免割傷。

3. 單元

沒有為該材料分配單元。

4. 內容

生物材料原產國：英國。

綿羊 675 和 678 的免疫計劃如下：肌肉注射一劑約 100 µg A/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 樣病毒 (NIB-104) HA 和弗氏*佐劑 (FCA)，兩周后服用 20 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。一周后給予包括 FIA 在內的另外四劑 20 微克劑量的 NIB-104 HA。初次免疫后七周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

綿羊 676 和 677 的免疫計劃如下：肌肉注射一劑約 100 µg A/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 樣病毒 (NIB-104) HA 和弗氏*佐劑 (FCA)，兩周后服用 20 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。一周后給予包括 FIA 在內的另外 6 次 20 微克劑量的 NIB-104 HA。初次免疫后九周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

綿羊 679 的免疫計劃如下：肌肉內注射一劑約 100 µg 的 A/Singapore/INFIMH-16-0019/2016 樣病毒 (NIB-104) HA 和弗氏*佐劑 (FCA)，隨后兩次數周后服用 20 微克劑量的弗氏不*佐劑 (FIA)。一周后給予包括 FIA 在內的另外七次 20 微克劑量的 NIB-104 HA。初次免疫后十周，收集血清并加入NaN3（0.05% w/v）。

然后通過 APHIS 批準的滅活 FMDV 方法處理血清。將從 SH675、676、677、678 和 679 獲得的抗血清匯集并用含有NaN3(0.05% w/v) 的 PBS 緩沖液按 1:4 稀釋，并裝入 2ml 體積的小瓶中。

5. 存儲

+2-8oC

但是，如果打算長期儲存試劑，即 >2 年，則可以將它們儲存在 -20oC。抗血清可以冷凍和解凍，對其在 SRD 測定中的使用沒有任何不利影響。

6. 開瓶指南

NIBSC 18/108 流感抗-A(標準品)  小瓶有螺帽；也可能存在內部塞子。應通過逆時針旋轉取下蓋子。應注意防止內容物丟失。請注意：如果在取下瓶蓋時有塞子，塞子應留在小瓶中或隨瓶蓋一起取下。

7. 材料的使用

對于在 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的測定，應將大約 30-40 ul 未稀釋的試劑添加到 1ml 瓊脂糖中。根據使用的 A/Singapore-INFIMH-16-0019/2016 樣抗原標準或根據當地實驗室條件，可能需要更改抗血清濃度。